2025年5月，深圳市第三人民医院／深圳国家感染性疾病临床医学研究中心卢洪洲教授团队在《Frontiers in Immunology》杂志上发表了研究成果，题为“Ultra-sensitive in situ detection of intracellular Mycobacterium tuberculosis with CRISPR/Cas12a”。研究团队开发出一种基于CRISPR/Cas12a的一步法检测技术，实现了对细胞内结核分枝杆菌（Mtb）的超灵敏检测，为结核病的诊断提供了新的高效手段。

　　结核病是由结核分枝杆菌引起的全球性重大传染病，其病原体能在巨噬细胞内生存并逃避检测，导致严重的临床症状。传统的检测方法如培养法、Xpert检测法等存在灵敏度低、耗时长等问题，难以满足快速、准确诊断的需求。卢洪洲教授团队创新性地利用CRISPR/Cas12a系统，针对结核分枝杆菌的IS6110基因设计了特异性检测方案。通过将Cas12a蛋白和crRNA组成的核糖核蛋白复合物（RNP）以及荧光淬灭（F-Q）探针导入RAW264.7巨噬细胞，实现了对细胞内结核分枝杆菌的直接可视化检测。CRISPR/Cas12a技术灵敏度高达94%，显著优于传统方法，且特异性达100%，展现了卓越的检测性能。

图1 基于CRISPR/Cas12a的细胞内结核分枝杆菌检测技术

　　卢洪洲教授指出，CRISPR/Cas12a技术突破了传统检测方法在细胞内结核分枝杆菌检测中的瓶颈。其高灵敏度和特异性使其能够在复杂生物样本中精准识别结核分枝杆菌，为临床诊断提供了更可靠的依据。

　　深圳市第三人民医院／深圳国家感染性疾病临床医学研究中心卢洪洲教授、郑明彬教授和赵鹏飞副研究员为本文共同通讯作者，深圳市第三人民医院林志强博士后为本文第一作者。该研究得到了国家重点研发计划、国家自然科学基金、深圳市基础研究面上项目等多个项目的支持。